在当前的核酸食品检测工作中，微生物检测是探针重中之重，为了获得更为精准的技术检验食品安全检测结果，多种食品检测技术在不断发展，食品本文主要对核酸探针检测技术进行分析，应用此项技术能够在短时间内找到食品内部存在的核酸有毒物质，通过对该技术的探针应用分析，希望为更多食品检测工作提供参考建议。技术检验 1前言 微生物泛滥不仅会出现多种致病菌，食品更会产生严重的应用食品安全事故，严重时还会威胁人们的核酸生命安全。核酸探针检测技术不仅具有极高的探针精准度，更能降低食品检测经费与时间，技术检验便捷的食品检测方式使其得到广泛应用并迅速发展。 2核酸探针基本概述 对核酸探针这一全新检测方式加以分析，应用此种检测方式的主要部分为RNA探针，RNA探针带有指示标记，能够与被检测食品核苷酸序列的一段单链cDNA或是cRNA分子相互结合。在检测过程中，主要以特异性cDNA、cRNA与人工合成的寡核苷酸探针为主。核酸探针应用范围较为广泛，由于RNA为单链分子，在检测工作中，能够与被检测食品靶序列迅速反应，此类杂交反应效率较高，具有较为显著的应用效果。 3核酸探针的制备工作 在食品检测工作中，借助基因检测方式可以了解样品的位置与序列。此类食品检测方式，能够在探针辅助下，在最短时间内得到不同被检测食品的基因信息，并判断基因信息来源是否相同。要想确保检测工作的顺利开展，应确保核酸探针充分发挥作用。在核酸探针制备工作中，应重点关注以下2项内容。第一，应根据所选择食品，借助交叉反应，对其中变化较为显著的核酸片段进行分析。第二，应在制备前，明确食品内部标记物，对常见标记物进行分析。在当前食品检测工作中，主要通过32P、125I以及35S几种同位素进行分析，并以此为基础，进行核酸探针制备工作。 4核酸探针在当前食品检测工作中的具体应用 4.1应用于DNA与RNA为靶向检测方式 在食品检测工作中，重点应关注以下3项指标。第一，菌落总数检测工作。第二，大肠杆菌群和沙门菌的检测工作。第三，霉菌、酵母与毒素的检测工作。在这些检测工作中，细菌来源种类多样化。在具体检测工作中，需结合DNA遗传序列，开展检测工作。并在检测过程中，遵循生物特异性，对其中的DNA序列进行分析与对比，进而设计出合理的检测方式。其次，以RNA为靶向目标的检测试验。此种检测方式，多以AccuProbe基因为探针，在检测工作中借助荧光物质，将标记特异性单链作为检测探针，应用此种检测方式，能够与待测细菌中的核糖体形成RNA互补，进而形成相对稳定的DNA与RNA杂交体。在具体检测工作中，应选择适合检测样品的试验试剂，借助试剂将多余探针去除。在试验后续阶段，可以通过发光仪器设备，做好杂交标记工作。借助核酸探针，以RNA为靶向目标的检测方式相对简单，检测用时较短，检测正确率较高，应得到重视与推广。 4.2核酸探针应用于水产品检测工作 随着食品种类不断增加，核酸探针检测技术已经得到较为广泛的应用，普遍应用于基因测序、食品检测工作中。在以往的检测工作中，显微镜检测方式存在较大误差，难以保证检测结果的精确度。再加上不规范操作的影响，或是使用检测试剂不合理，缺乏检测经验，这些因素都会影响检测结果。因此，可以借助核酸探针检测方式，弥补传统检测方式的不足，应用科学检测原理，不断提升检测结果的可信度。例如，在水资源与水产品检测工作中，应以核酸检测为基础，对导致腹泻的大肠杆菌进行检测，在实际检测工作中，可以借助ST基因片段，判断水产品中是否含有此类物质。为确保相关水产品质量与安全，应在水产品销售前，对水产品进行检测。在水产品检测工作中，可以应用核酸探针检测方式，对水产品存在的过量微生物、细菌以及蠕虫进行检测与分析。结合核酸探针检测所得技术数据，明确水产品中的生物特点，才能有效鉴别其中的有害成分，最终提升水产品检测质量。要想维护水产品市场稳定发展，为消费者提供更为优质的产品，势必要做好水产品检测工作。 4.3核酸探针应用于肉制品检测 在肉制品检测工作中，常会检测出牛巴贝斯虫，此种寄生虫具有较高传染性，牛巴贝斯虫病为原虫病，多由泰勒焦虫感染所致。由于此类寄生虫寄生于病畜血细胞中，其检测难度较大，为保证食品安全，禁止病畜出现在市场中，应借助DNA探针检测方式，以核酸探针检测为主，并结合皂素处理方式，解决不能回收全部虫体的问题，进而提升核酸探针检测的有效性和灵敏度。首先，在检测工作中，应对畜禽血样进行收集与处理，将血样置于37℃水浴处理，确保血样融化。吸取100μL血样，在血样中加水至500μL，冰浴10min，以3000r/min进行离心处理，离心时间10min。当血样中的变性血红蛋白逐渐沉淀后，将上述被测物质转移至另一离心管中。与此同时，应对正常畜禽血液进行处理，借助健康畜禽白细胞对被测样品进行冷藏与稀释。每个稀释后的血样，相当于原血样中的50μL。对这一血样加以分析，稀释过后的病畜血样虫量较大。因此，为保证检测结果精确度，在本次检测工作中，最终确定检测稀释度为500μL。 在血样处理工作中，应采取以下3种方式，对血样进行处理。 （1）皂素处理方法，在上述血样中加入皂素，将皂素浓度控制在0.15%，并在处理完成后，在其中加入10mg氯化钠（NaCl）与0.5mg乙二胺四乙酸（EDTA）。将血样浓度控制在150mM与10mM中。在后续试验中，将血样在室内放置15min，在1×104r/min下进行离心处理，并将离心时间控制在5min。弃上相，并加入50μL去离子水，做好沉淀处理工作。 （2）可以借助乙酸处理方式，在上述稀释液中加入细胞裂解液，并补加10mgNaCl，在沉淀过程中，借助TEPH7.6悬浮液，5000rpm离心5min，弃上相，采取重复洗涤方式，得到去离子的悬浮沉淀物质。 （3）虫体消化方式，在提取虫体DNA后，应用乙醇过滤，借助离心方式，收取虫体DNA。在完成上述步骤后，借助点杂交方式进行试验，并对核酸探针检测结果加以分析，得到精准检验结果，保证食品安全与质量。 5讨论 食品安全问题尤为重要，近些年，食品安全问题频发，严重影响人们的健康与生活。在当前食品检测过程中，常见的是微生物污染问题，应借助核酸探针检测方式，及时发现产品内部存在的问题，从源头上加以管控，最大限度降低质量问题，为更多食品安全检测工作的开展打下坚实基础。 声明：本文所用图片、文字来源《质量安全与检验检测》2020年第5期，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系 相关链接：核酸，大肠杆菌，微生物，离心管